恒温恒湿试验机制冷剂的选择是一个比较复杂的技术经济问题，需要考虑的因素很多，因为制冷剂属于消耗品，恒温恒湿试验机使用几年后，一般制冷剂消耗完了，制冷效果达不到要求，恒温恒湿试验机采用的是什么冷媒，需要进行全面的技术分析。
目前，市场上大多数的恒温恒湿试验机是采用R404作为主压缩机的冷媒，而“冷媒”俗名雪种，学名制冷剂，在环境试验箱行业中，制冷剂被称为冷媒。在使用恒温恒湿试验机的过程中，低温制冷部分也是非常重要的一部分，也是其比较容易出现问题的一部分;而冷媒作为低温制冷不可或缺的部分，无论是维修或者加冷媒，都需要技术员工对冷媒有一定的了解。那为什么要使用R404作为恒温恒湿试验机的冷媒呢?
恒温恒湿试验机制冷剂考虑环保的要求必须选用符合国家环保法规的制冷剂。恒温恒湿试验机制冷剂考虑压缩机的类型不同的制冷压缩机的工作原理有所不同。体积式压缩机是通过缩小制冷剂蒸气的体积提高其压力的，一般选用单位体积制冷量大的制冷剂，如R134a,R22等。制冷剂的种类很多，随着科学技术的进步.新工质不断出现，以适宜于不同的制冷装置。
由于R404完全不含破坏臭氧层的CFC、HCFC，是目前世界绝大多数国家的认可并推荐的主流低温环保制冷剂，符合美国环保组织EPA、SNAP和UL的标准，符合美国采暖、制冷空调工程师协会(ASHRAE)的A1安全等级类别(这是非常高的级别，对人身体无害)。
一般的，恒温恒湿试验机的标准温度测试范围为-70℃～150℃，这个温度适合大部分要做温度试验的产品。而R404临界温度为72.4℃，即是说在恒温恒湿试验机72.4℃时开始制冷，加快恒温恒湿试验机的降温速度，临界温度高，这是其一;R404沸点为-46℃，也就是说R404在72.4℃～-46℃之间都能制冷，制冷跨度大，这是其二。
恒温恒湿试验机应考虑制冷剂性质根据制冷剂的热力性质、物理性质和化学性质，选用那些无毒、不爆炸、不燃烧的制冷剂;选用制冷剂应传热好、阻力小、与制冷系统用材料相容性好。所以对于有些由国家规定的行业，必须采用无毒、无污染、安全制冷效果好的制冷剂。
根据制冷剂温度和冷却条件的不同，选用高温(低压)、中温(中压)、低温(高压)制冷剂。通常选择的制冷剂的标准蒸发温度要低于制冷温度10℃。选择制冷剂还应考虑制冷装置的冷却条件、使用环境等。运行中的冷凝压力不应超过压缩机安全使用条件的规定值。恒温恒湿试验机可做零下60℃的温度试验，所以制冷剂的要求更高。和社会上的汽车空调制冷剂不同的是，汽车制冷剂只能用车外空气做冷却介质，对其产生影响的气温、风速、太阳辐射、热辐射等因素无不在频繁发生变化，其运行条件决定它只能选用高温(低压)制冷剂，过去选用R12，目前大多选用R134a。
